• 歡迎訪問杭州安普飼料科技有限公司

    客服電話:18057136993

    新聞中心
    技術專題
    當前位置: 首頁 > 新聞中心 > 技術專題

    “溶菌酶”檢測方法

    2014-09-01
    本品含溶菌酶(酶活力每1mg不低于5000單位)應為標示量的85.0%以上。
    【性狀】 溶菌酶為一種堿性蛋白質,常與氯離子結合成為溶菌酶氯化物。本品為白色或微黃色的結晶性或無定形粉未,無臭、味甜,水溶液遇堿易破壞。
    ?
    本品在水中易溶,在丙酮、乙醚中不溶。
    【鑒別】
    (1)取本品10mg,溶于1ml水中,加30%三氯醋酸2滴,產生白色沉淀。
    (2)取試管一支,加5%溶菌酶水溶液2滴、10%氫氧化鈉5滴及1%硫酸銅溶液1滴,混勻后,應顯紫玫瑰色。
    【檢查】 
    (1)PH值  本品的1%水溶解,PH值應為4.0~7.0(《中國獸藥典》1990年版一部附錄29頁)
    (2)熾灼殘渣  不得過10%。(《中國獸藥典》1990年版一部附錄39頁)
    (3)干燥失重  取本品0.5g,在80℃減壓干燥3小時,減失重量不得過8.0%。
    ?????  其它應符合粉劑項下的有關規定(附錄4頁)
    【酶活力測定】
    底物的制備 菌種為溶酶小球菌(Micrococcus Lysodeiktidus)接種于固體培養基上,置35℃培養48小時,用水將菌體洗下,用紗布濾過,濾液離心后,傾去上層清液,用水洗滌菌體數次,然后用少量水懸浮,冰凍干燥,得淡黃色粉末,供測定用,保存一年。
    樣品溶液的制備  精密稱取本樣品4mg,加放于M/10磷酸緩沖液「取磷酸二氫鈉(NaH2PO4·2H2O)11.70g,磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)7.86g,乙二胺四醋酸二鈉0.372g,加水溶解使成1000ml,PH為6.2」100ml溶解,即得(1ml緩沖液含有溶菌酶40μg)。
    另外稱取底物(即菌體)10mg,加上述緩沖液4~5ml,在勻漿器內研磨2分鐘,傾出,用緩沖液稀釋到50ml,懸浮液在25℃時,用分光光度法,按中國藥典1977年版附錄,在450nm波長處測定吸收度為0.65~0.75時,進行活力測定。
    酶活力的測定  精密量取底物懸浮液4ml,放入比色杯中,用分光光度法,按中國藥典1977年版附錄,在450nm波長處測定吸收度,作為零時讀數,然后量取樣品溶液0.2ml(相當于8μg溶菌酶),加入比色杯中,迅速混合,用秒表計算時間,每隔30秒測定吸收度,到90秒時共記下四個吸收度讀數,根據單位活力定義在25℃,PH6.2,波長450nm時,每分鐘引起吸收度下降0.001為一個酶活力單位,按下試計算,即得。
    1000
    (零時吸收度—60秒時吸收度)×???  樣品μg數  ×1000=每1mg酶單位數
    ?
    ?
    ?
    ?
    杭州安普飼料技術部
    上一頁溶菌酶對斷奶仔豬生產性能的影響
    下一頁天然食品防腐劑及其發展前景

    版權所有?杭州安普飼料科技有限公司 ???? 備案號:浙ICP備18005852號-1
    一本二本三本是什么意思